REPORTE DE PRÁCTICA "GOTA GRUESA Y EXTENDIDO"


SUBMÓDULO: IDENTIFICA TÉCNICAS PARASITOLÓGICAS

PRÁCTICA: GOTA GRUESA Y EXTENDIDO 

PROFESORA: ING. IVONNE ÁVILA VALENCIA

GRUPO: 3DM

ESPECIALIDAD: LABORATORIO CLÍNICO

FECHA: 27/09/19

INTEGRANTES DEL EQUIPO:
DANIELA CORNEJO BARRERA              N.L. 16
ROSSYO PÉREZ MALDONADO              N.L. 39
NOELIA SANTILLÁN VÍVEROS                N.L. 47
JATZIRY SÁNCHEZ GÓMEZ                    N.L. 44
LUIS ANTONIO REYES VELEZ               N.L. 41
JUAN LUIS HERNÁNDEZ VALDEZ          N.L. 28
JULIAN SALINAS ZAYRA DE LA LUZ      N.L. 29
CITLALLI RODRIGUEZ ESPINOZA          N.L. 42


INTRODUCCIÓN
A continuación se presentará la práctica realizada los días 26 y 27 de septiembre del 2019 en la cual llevamos a cabo la prueba de gota gruesa y extendido o gota fina, empleando así los conocimientos adquiridos durante el parcial. 
Esto se realizó mediante la obtención de una muestra de sangre cutánea, en base a que se requerían dos gotas de sangre para ser colocadas en un portaobjetos, de manera que una quedará extendida finamente y otra gruesa, tal y como lo indica su nombre, posteriormente se realiza la tinción de Giemsa. 
La preparación de gota gruesa es un tipo de técnica que se utiliza para el estudio de parasitosis en sangre, como las distintas especies de Plasmodium, responsables de la Malaria o Paludismo, y para la identificación de distintas especies de Trypanosoma (T. gambiense y T. rhodesiense, responsables de la enfermedad del sueño; T. cruzi, agente responsable de la enfermedad de Chagas). 
La extensión fina se usa con el fin de observar a los eritrocitos infectados y a los parásitos que hay dentro de ellos (en caso de que la persona esté infectada). Mientras que en la gota gruesa se busca observar el aspecto de los parásitos que puedan encontrarse, ya que los eritrocitos están lisados y los parásitos palúdicos suelen ser más abundantes y compactos que en la extensión fina.
Realizamos la siguiente práctica a base de cumplir con los objetivos establecidos en el presente: 

OBJETIVOS 
·         Trabajar con nuevas técnicas de laboratorio para la identificación de microorganismos existentes en muestras biológicas, específicamente en muestras sanguíneas. 
·         Reconocer las propiedades que poseen las diferentes sustancias empleadas en dichas técnicas para el aislamiento de los parásitos.
·         Identificar las formas parasitarias que se pueden identificar en la sangre de un determinado paciente. 
·         Perfeccionar el manejo del microscopio, con el fin de hacer uso de él en una forma más eficaz.


FUNDAMENTO 
El frotis de sangre de gota fina y gota gruesa, se usa para determinar si el paciente tiene paludismo (malaria), siendo ésta la prueba más fácil y confiable para dicha determinación.
Para este estudio se toma una muestra sanguínea mediante punción capilar. 
Un frotis de gota gruesa es una gota de sangre en un portaobjetos. Es útil para detectar la presencia de parásitos, porque examinan una muestra más grande de sangre. 
Un frotis de gota fina es una gota de sangre que se desparrama por un área grande del portaobjetos. El frotis de gota fina ayuda a descubrir qué especie de paludismo está causando la infección.
Los resultados de esta prueba pueden ser:
Normales: No existe presencia  de  parásitos en glóbulos rojos 
Anormales: Hay presencia de parásitos en los glóbulos rojos. Se identifica la especie de Plasmodium responsable de la infección. También se determina el porcentaje de glóbulos rojos infectados. 
Tinción de Giemsa 
Las tinciones hematológicas se pueden definir como el conjunto de técnicas necesarias para teñir y diferenciar los distintos componentes celulares de la sangre. Estos componentes conforman la fracción forme de la sangre, y gracias a las tinciones se pueden diferenciar en un microscopio óptico.

Las técnicas en que se basan las tinciones hematológicas hacen uso de colorantes. Éstos interactúan con los componentes celulares dispuestos a modo de frotis sanguíneo sobre un portaobjetos. Los colorantes son sustancias capaces de fijarse selectivamente según su afinidad química.

Un colorante tipo Romanowsky está basado en el uso de una mezcla formada por un colorante ácido (eosina) y uno o varios colorantes básicos (azul de metileno, azur A, azur B y azur C). Las tinciones que se realizan con este tipo de colorante se denominan tinciones panópticas o tinciones tipo Romanowsky.

La tinción de Giemsa está catalogada como tinción tipo Romanowsky. Del mismo modo que su colorante, que da nombre a la tinción, está catalogado también como colorante tipo Romanowsky.

El colorante de Giemsa es una solución en metanol de un colorante ácido (eosina) y dos colorantes básicos (azur y azul de metileno). Estos colorantes teñirán las estructuras celulares dependiendo de su carácter ácido o básico.

MATERIALES
Portaobjetos

Lamina de vidrio rectangular de color transparente utilizada para almacenar muestras y objetos con el fin de observarlas bajo el microscopio.
Torundas alcoholadas y sin alcohol
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Producto para el cuidado de la salud, uso odontológico, higiene personal, limpieza de heridas y zonas donde se realizarán punciones, asepsias, etc.
Lancetas



Son objetos pequeños y filosos que se usan para pinchar la piel, con el objetivo de obtener una porción de la sangre del dedo, para posteriormente ser analizada.
Cuba

Es el lugar donde se colocan los portaobjetos para su tinción.
Metanol
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El Metanol es un líquido incoloro, volátil e inflamable con un ligero olor alcohólico en estado puro. Es un líquido altamente venenoso y nocivo para la salud. Es miscible en agua, alcoholes, esteres, cetonas y muchos otros solventes; además, forma muchas mezclas azeotrópicas binarias. Es poco soluble en grasas y aceites.
Pipeta Pasteur y chupete
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Es similar a un cuentagotas, generalmente formada por un tubo de vidrio con borde cónico. Sirve para hacer la transferencia de pequeñas cantidades de líquidos.
Colorante de Giemsa
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Permite hacer el diagnóstico de enfermedades parasitarias tales como la malaria, el mal de Chagas y la leishmaniasis.
Agua destilada
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El agua destilada es usada en los laboratorios para trabajar como medida higiénica, se utiliza tanto en los hospitales como en los laboratorios químicos. El agua destilada está libre de contaminantes, pues es tratada con métodos refinados para vender un producto que no lleve microorganismos por eso se usa en laboratorios.
Microscopio
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Un microscopio es un instrumento que nos permite observar entes demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. Por ejemplo, algunos microorganismos.
Aceite de inmersión
                
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El aceite de inmersión es un líquido viscoso y transparente que tiene un alto índice refractivo. Por este motivo es muy utilizado en las observaciones microscópicas, ya que brinda la propiedad de concentrar la luz cuando esta pasa a través del objetivo de 100X del microscopio, aumentando su poder de resolución.


PROCEDIMIENTO 
1. Como primer paso, se procedió a realizar la punción cutánea al paciente, cumpliendo con las medidas de seguridad establecidas. Entendiendo que, primero se le realizó una asepsia en el dedo a puncionar, se insertó la lanceta y se prosiguió a limpiar la primer gota con alcohol, la segunda y la tercera se colocaron en el portaobjetos. 




2. Colocadas las gotas, se continúo con el proceso y se realizó el extendido, con la laminilla auxiliar tocar la gota de sangre, hasta que se extienda por los costados y realizar el extendido con un movimiento rápido. 

3. En la tercer gota, con la laminilla auxiliar formar un cuadro de 1.0 a 1.5 cm2 o bien un círculo.

4. Colocadas ambas muestras en el portaobjetos, se procederá a dejarlas secar, cuidando que se encuentren en un espacio libre de contaminantes. 

5. Ya que las dos muestras se encuentren secas, se cubrirán las extensiones con metanol y se esperará 4-5 minutos.



6. Se descarta para eliminar el metanol y a continuación, se cubren las extensiones con solución extemporánea de Giemsa recién diluida a 1/10 (1 gota de Giemsa por 9 gotas de agua destilada) y se dejar actuar durante 25 minutos.¨
*Por escasez de tiempo, nuestros frotis actuaron durante 10 minutos



7. En un últimos puntos, se escurre el colorante, se lava el frotis con agua destilada o con solución buffer y se dejan secar las extensiones al aire, dispuestas en forma vertical. 

8. Para concluir, se procede a realizar la observación el el microscopio de los frotis sanguíneos teñidos. 

GOTA GRUESA

 EXTENDIDO FINO
EXTENDIDO FINO

CONCLUSIÓN

La práctica resultó ser muy enriquecedora, puesto que retomamos aprendizajes del módulo anterior: Auxilia en los procesos básicos de laboratorio; específicamente, el protocolo que se debe seguir cuando se va a realizar una punción cutánea. Asimismo, adquirimos nuevos conocimientos relacionados a otras técnicas empleadas en el laboratorio, recordando que, con la práctica podremos mejorar nuestro desempeño al realizar cada una de ellas. 
Resulta relevante mencionar que esta práctica nos ayudó a hacer una reflexión de la importancia que poseen las enfermedades parasitarias en nuestra vida, su contagio es tan sencillo, que cada día nos exponemos a ser huéspedes de un parásito, claro está, que algunas personas por su contexto tienen un mayor grado de que esto sea posible. Sin embargo, siempre se puede recurrir a la prevención de ellas. 

RESULTADOS Y POSIBLE DX
No se reportó ningún microorganismo fuera de lo normal en nuestra muestra, únicamente visualizamos eritrocitos y leucocitos, sin embargo, realizamos las investigaciones pertinentes para conocer los posibles parásitos a identificar.
Este método es empleado para el diagnóstico de parásitos en sangre, como se mencionó anteriormente, en él, se pueden identificar especies de Plasmodium, las cuales son responsables de Malaria o Paludismo, así como, la identificación de especies pertenecientes a Trypanosoma.
La Malaria es una enfermedad que se transmite por la picadura de un mosquito infectado. 
La gravedad de la malaria depende de la especie de Plasmodium.
Los síntomas son escalofríos, fiebre y sudor que generalmente se manifiestan algunas semanas después de la picadura.
Las personas que viajan a regiones donde la malaria es común suelen utilizar fármacos preventivos antes, durante y después del viaje. El tratamiento incluye el uso de antipalúdicos.
La enfermedad de Chagas es una infección sistémica causada por el protozoo Trypanosoma cruzi. Es una zoonosis en la que participan un gran número de reservorios vertebrados y transmisores triatóminos.
Su importancia radica en su elevada prevalencia, su incurabilidad, las grandes pérdidas económicas por incapacidad laboral, y la muerte repentina de personas aparentemente sanas. Se contempla dentro de la lista de las principales "enfermedades desatendidas". 


REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Autor: Dra. Teresa Uribarren Berrueta
Fecha de Publicación: 23 de octubre de 2018
Título: ENFERMEDAD DE CHAGAS
Fecha y hora de Consulta: 27 de septiembre de 2019 a las 17:00 pm
Dirección URL: http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/trypanosomosis.html

Autor: Organización Mundial de la Salud
Fecha de Publicación: 11 de junio de 2018
Título: Paludismo
Fecha y hora de Consulta: 26 de septiembre de 2019 a las 16:58 pm
Dirección URL: https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/malaria

Autor: Desconocido
Fecha de Publicación:  12 de abril de 2004
TítuloProcedimientos diagnósticos
Procedimientos diagnósticos para
Especímenes sanguíneos
Fecha y hora de Consulta: 27 de septiembre de 2019 a las 15:17 pm
Dirección URL: https://www.mcdinternational.org/trainings/malaria/spanish/DPDx/HTML/Frames/DiagnosticProcedures/body_dp_bloodprocess

Autor: Desconocido
Fecha de Publicación: 11 de septiembre de 2019
Título: Malaria
Fecha y hora de Consulta: 26 de septiembre de 2019 a las 20:00 pm
Dirección URL: https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/000621.htm

Autor: Dra. Teresa Uribarren Berrueta
Fecha de Publicación: 14 de febrero de 2014
Título: Paludismo o Malaria
Fecha y hora de Consulta: Noviembre del 2017
Dirección URL: http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/paludismo.html

Autor: Desconocido 
Fecha de Publicación: 18 de octubre del 2016
Título: Sangre
Fecha y hora de Consulta: 27 de septiembre de 2019 a las 15: 56 pm
Dirección URL: https://www.cdc.gov/parasites/es/blood.html

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