REPORTE DE PRÁCTICA "TINCIÓN DE KINYOUN"
SUBMÓDULO: IDENTIFICA TÉCNICAS PARASITOLÓGICAS
PRÁCTICA: TINCIÓN DE KINYOUN
PROFESORA: ING. IVONNE ÁVILA VALENCIAGRUPO: 3DM
ESPECIALIDAD: LABORATORIO CLÍNICO
FECHA: 11/10/19
INTEGRANTES DEL EQUIPO:
DANIELA CORNEJO BARRERA N.L. 16
ROSSYO PÉREZ MALDONADO N.L. 39
NOELIA SANTILLÁN VÍVEROS N.L. 47
JATZIRY SÁNCHEZ GÓMEZ N.L. 44
LUIS ANTONIO REYES VELEZ N.L. 41
JUAN LUIS HERNÁNDEZ VALDEZ N.L. 28
JULIAN SALINAS ZAYRA DE LA LUZ N.L. 29
CITLALLI RODRIGUEZ ESPINOZA N.L. 42
INTRODUCCIÓN
La tinción Kinyoun es
una técnica de coloración utilizada para teñir bacterias y parásitos ácido
alcohol resistente. Nació de la modificación de la coloración de Ziehl-Neelsen; ambas técnicas se interpretan de
la misma manera pero se diferencian en dos elementos: en la preparación del
reactivo principal y en que la técnica de Kinyoun no utiliza calor. Está
indicada para teñir Micobacterias, como M. tuberculosis y M. leprae, además de otras
micobacterias atípicas; Nocardia y
algunas especies de Criptosporidium.
La tinción de Ziehl Neelsen es una tinción
diferencial ideada por dos médicos alemanes, Franz Ziehl, un
bacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo. Su finalidad es la
de identificar mycobacterias (fuertemente ácido-alcohol resistentes), nocardias
(débilmente AAR), actinomices (débilmente AAR) o parásitos como
cryptosporidium.
Las bacterias ácido-alcohol resistentes no pueden
ser clasificados según la tinción de
Gram, la técnica más común en la microbiología actual.
Sin embargo pueden ser teñidas con algunas tinciones combinadas con calor, como
la de Ziehl-Neelsen. Una vez teñidas tienen la capacidad de resistir la
decoloración de una combinación de alcohol/ácido, el decolorante más común en
los protocolos de tinción de bacterias.
En la práctica realizamos la tinción tradicional,
aunque existen dos variantes más. Una de ellas es la denominada variante en
frío o Tinción de Kinyoun. Y la otra es la variante histológica
destinada a la búsqueda e identificación de microorganismos AAR en tejidos.
OBJETIVOS
·
Trabajar con nuevas técnicas de laboratorio para la identificación de
microorganismos existentes en muestras biológicas, específicamente en
muestras de heces.
·
Reconocer las propiedades que poseen las diferentes sustancias empleadas
en dichas técnicas para el aislamiento de los parásitos.
· Conocer
los diferentes tipos de tinciones existentes, así como, los reactivos empleados
en cada una y sus consideraciones de manejo.
·
Perfeccionar el manejo del microscopio, con el fin de hacer uso de él en
una forma más eficaz.
FUNDAMENTO
El reactivo principal
de la tinción es la fucsina, que tiene la propiedad de unirse a los ácidos
carbólicos existentes dentro de la pared celular cérea, rica en lípidos (ácidos
micólicos) de las micobacterias y algunos parásitos. Esa unión no es
contrarrestada por el decolorante ácido; por ello, los microorganismos se
definen como ácido alcohol resistentes. De esta manera los microorganismos
ácido alcohol resistentes toman el característico color rojo, mientras que todo
lo que no es ácido alcohol resistente se decolora y se tiñe de azul.
Esta tinción es útil
para visualizar quistes de protozoos intestinales que tienen la propiedad de
ser ácido-alcohol resistentes (AAR). Tal como, Cryptosporidium es un
protozoo (parásito unicelular) intestinal de elevada prevalencia a nivel
mundial. Produce predominantemente diarrea acuosa con tendencia a la
recurrencia en niños y personas inmunodeprimidas.
MATERIALES
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Portaobjetos
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Lamina de
vidrio rectangular de color transparente utilizada para almacenar muestras y
objetos con el fin de observarlas bajo el microscopio.
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Torundas
alcoholadas y sin alcohol
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Producto para el cuidado de la salud,
uso odontológico, higiene personal, limpieza de heridas y zonas donde se
realizarán punciones, asepsias, etc.
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Lancetas
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Son objetos
pequeños y filosos que se usan para pinchar la piel, con el objetivo de
obtener una porción de la sangre del dedo, para posteriormente ser analizada.
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Cuba
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Es el lugar
donde se colocan los portaobjetos para su tinción.
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Metanol
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El Metanol
es un líquido incoloro, volátil e inflamable con un ligero olor alcohólico en
estado puro. Es un líquido altamente venenoso y nocivo para la salud. Es
miscible en agua, alcoholes, esteres, cetonas y muchos otros solventes;
además, forma muchas mezclas azeotrópicas binarias. Es poco soluble en grasas
y aceites.
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Pipeta pasteur y chupete
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Es similar a
un cuentagotas,
generalmente formada por un tubo de vidrio con borde
cónico. Sirve para hacer la transferencia de pequeñas cantidades de líquidos.
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Ácido
alcohol
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Un éster es
un compuesto derivado formalmente de la reacción química entre un ácido
carboxílico y un alcohol. Cuando se habla de ésteres se hace alusión a los
ésteres de ácidos carboxílicos, sustancias cuya estructura es R-COOR', donde
R y R' son grupos alquilo.
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Azul de metileno
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El azul de
metileno, cuyo nombre científico es cloruro de metiltionina, es un colorante
orgánico que se usa para tratar una enfermedad llamada metahemoglobinemia.
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Fucsina
Básica
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La fucsina
es una sustancia colorante, de color rojo tirando a púrpura. La fucsina tiene
muchas aplicaciones en el campo de la medicina. Se utiliza, principalmente,
en la tinción de Gram (prueba bacteriológica que se utiliza para hacer un
diagnóstico): colorea las bacterias Gram-negativas en rojo.
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Agua
destilada
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El agua destilada es usada en los laboratorios para
trabajar como medida higiénica, se utiliza tanto en los hospitales como en
los laboratorios químicos. El agua destilada está libre de contaminantes,
pues es tratada con métodos refinados para vender un producto que no lleve
microorganismos por eso se usa en laboratorios.
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Microscopio
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Un microscopio es un instrumento que nos permite observar
entes demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. Por ejemplo, algunos
microorganismos.
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Aceite
de inmersión
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El aceite de
inmersión es un líquido viscoso y transparente que tiene un alto índice refractivo.
Por este motivo es muy utilizado en las observaciones microscópicas, ya que
brinda la propiedad de concentrar la luz cuando esta pasa a través del
objetivo de 100X del microscopio, aumentando su poder de resolución.
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1.- Primeramente, realizamos un frotis de la muestra de heces.
2.- Posteriormente, este se fijó con calor; otra opción era cubrirlo con alcohol
metílico.
3.- A continuación, se procedió a cubrir la preparación con fucsina
dejando reposar durante 5 minutos.
4.- Se lava con ácido alcohol.
CONCLUSIÓN
La práctica resultó ser muy enriquecedora, puesto que cada uno de los pasos de la tinción se llevó a cabo de una manera más eficaz. Asimismo, adquirimos nuevos conocimientos relacionados a otras técnicas empleadas en el laboratorio para la coloración, recordando que, con la práctica podremos mejorar nuestro desempeño en el desarrollo de cada una.
Es relevante mencionar que esta práctica, (al igual que todas las del submódulo) nos ayudó a hacer una reflexión de la importancia que poseen las enfermedades parasitarias en nuestra vida, su contagio es tan sencillo, que cada día nos exponemos a ser huéspedes de un parásito, claro está, que algunas personas por su contexto tienen un mayor grado de que esto sea posible. Sin embargo, siempre se puede recurrir a la profilaxis de las anteriores.
El apoyo de nuestro docente, fue de suma importancia para la interpretación de resultados, ya que, es posible que se llegue a confundir la morfología de un parásito con otros compuestos pertenecientes a la flora normal de nuestra muestra. De la misma forma que hacemos un reconocimiento en el ámbito pedagógico a nuestra profesora; todos los conocimientos teóricos que transmite en el contacto de profesor - alumno en la estancia en el aula, se convierten en herramientas de gran apoyo para lo mencionado anteriormente.
El apoyo de nuestro docente, fue de suma importancia para la interpretación de resultados, ya que, es posible que se llegue a confundir la morfología de un parásito con otros compuestos pertenecientes a la flora normal de nuestra muestra. De la misma forma que hacemos un reconocimiento en el ámbito pedagógico a nuestra profesora; todos los conocimientos teóricos que transmite en el contacto de profesor - alumno en la estancia en el aula, se convierten en herramientas de gran apoyo para lo mencionado anteriormente.
RESULTADOS Y POSIBLE DX
No se reportó ningún microorganismo fuera de lo normal en nuestra muestra, únicamente visualizamos ciertos percances de la tinción, sin embargo, realizamos las investigaciones pertinentes para conocer los posibles parásitos a identificar.
Como se mencionó anteriormente, dicha técnica es utilizada para el diagnóstico de Cryptosporidium. Entre los signos y síntomas del cuadro clínico, es posible identificar lo siguiente: diarrea acuosa, vómitos, fiebre y dolor abdominal. En pacientes inmunocompetentes es autolimitada.
En los inmunocomprometidos (ej: SIDA, cáncer, transplantados con tratamiento inmunosupresor y enfermedades que afectan al sistema inmunológico), sin embargo, presenta diarrea crónica con posible malabsorción y diarrea grave (coleriforme) principalmente en pacientes con SIDA y menos de 50 CD4/ml. En los pacientes con SIDA se produce afectación extraintestinal como colangitis esclerosante, afectación pulmonar y del oído medio.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Autor: Marielsa Gil
Fecha de Publicación: Desconocida
Fecha y hora de Consulta: 11 de octubre del 2019 a las 16:59 pm
Dirección URL: https://www.lifeder.com/tincion-de-kinyoun/
Autor: Dra. Teresa Uribarren Berrueta
Fecha de Publicación: 02 de febrero de 2018
Título: CRYPTOSPORIDIOSIS o CRYPTOSPORIDIASIS o CRIPTOSPORIDIOSIS
Fecha y hora de Consulta: 10 de octubre de 2019 a las 16:58 pm
Dirección URL: http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/criptosporidiasis.html
Autor: Fundación IO
Fecha de Publicación:
Título: CRYPTOSPORIDIUM
Fecha y hora de Consulta: 10 de octubre de 2019 a las 17:17 pm
Dirección URL: https://fundacionio.com/salud-io/enfermedades/parasitos/cryptosporidium/
Autor: ELSEVIER
Fecha de Publicación: 2012
Título: Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica
Fecha y hora de Consulta: 11 de octubre de 2019 a las 20:00 pm
Dirección URL: https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-diagnostico-microbiologico-cryptosporidium-spp-giardia-S0213005X12001711
Autor: Desconocido
Fecha de Publicación: 29 de julio de 2017
Título: Técnicas histológicas. Protocolos.
COLORANTE
FUCSINA ESCARLATA
Fecha y hora de Consulta: 11 de octubre de 20l9 a las 18:09 pm
Dirección URL: https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/protocolos/s-colorante-fucsina-escarlata.php
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