REPORTE DE PRÁCTICA "MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN WILLIS"


SUBMÓDULO: IDENTIFICA TÉCNICAS PARASITOLÓGICAS

PRÁCTICA: MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN DE WILLIS

PROFESORA: ING. IVONNE ÁVILA VALENCIA

GRUPO: 3DM

ESPECIALIDAD: LABORATORIO CLÍNICO

FECHA: 18/10/19

INTEGRANTES DEL EQUIPO:
DANIELA CORNEJO BARRERA              N.L. 16
ROSSYO PÉREZ MALDONADO              N.L. 39
NOELIA SANTILLÁN VÍVEROS                N.L. 47
JATZIRY SÁNCHEZ GÓMEZ                    N.L. 44
LUIS ANTONIO REYES VELEZ               N.L. 41
JUAN LUIS HERNÁNDEZ VALDEZ          N.L. 28
JULIAN SALINAS ZAYRA DE LA LUZ      N.L. 29
CITLALLI RODRIGUEZ ESPINOZA          N.L. 42


INTRODUCCIÓN


En 1921 Willis, basándose en métodos de flotación simple anteriores describió el método que lleva su nombre, el cual, dada su sencillez, se puede utilizar en trabajos de campo, ya que para realizarlo únicamente se requiere microscopio y laminillas. Este método se basa en un principio de flotación simple, utilizando una solución de cloruro de sodio de una densidad entre 1.200 y 1.250, en la cual los quistes, huevos y larvas flotan perfectamente.
Las técnicas de flotación permiten la separación de quistes de protozoos y huevos de ciertos helmintos del exceso de residuos mediante el uso de soluciones con elevada gravedad específica. Los elementos parasitarios son recuperados de la capa superficial y los residuos se mantienen en el fondo del tubo. Con estas técnicas los preparados son más limpios que los obtenidos por sedimentación.
La práctica de laboratorio es el tipo de clase que tiene como objetivos instructivos fundamentales que los estudiantes adquieran las habilidades propias de los métodos de la investigación científica, amplíen, profundicen, consoliden, realicen, y comprueben los fundamentos teóricos de la asignatura mediante la experimentación empleando los medios de enseñanza necesarios, garantizando el trabajo individual en la ejecución de la práctica.

OBJETIVOS
·        -  Aprender el proceso y la técnica para llevar a cabo un método de concentración.
·  - Reconocer la morfología de los respectivos helmintos en el campo presente en el microscopio.
-    - Perfeccionar el manejo del microscopio, con el fin de hacer uso de él en una forma más eficaz.

FUNDAMENTO
Este método de flotación, consiste en preparar la materia fecal con solución saturada de cloruro de sodio (NaCl).
Es una buena técnica, muy popular en laboratorios, y de bajo costo.
Recomendado especialmente para la investigación de geohelmintos.
Por su sencillez se puede utilizar en el campo, donde no se cuentan con demasiados materiales o reactivos para realizar otros métodos.
Los Huevos de helmintos de peso específico menor que la solución saturada de NaCl tienden a subir y adherirse a una lámina colocada en contacto con la superficie del líquido.
Este método es de alta sensibilidad en el diagnóstico de huevos livianos de helmintos.
La concentración fecal ha llegado a ser un procedimiento de rutina como parte de un examen
completo para el diagnóstico de parásitos. La finalidad de la concentración de heces es separar los
parásitos de la masa de material de la muestra, (formada por bacterias, alimento no digerido, etc.) y
tratar de aumentar la cantidad de microorganismos para favorecer su visualización debido a que los
parásitos microscópicos no se multiplican en las heces como lo hacen algunos de ellos en ciertas
condiciones de cultivo in vitro.
 A veces la cantidad de microorganismos en una muestra fecal es escasa. Esto puede suceder por
intermitencia en la eliminación (característica de los parásitos), porque algunos parásitos eliminan
pocos huevos, quistes u ooquistes durante su ciclo de vida, o bien porque el paciente es portador o
ha recibido tratamiento antiparasitario.
 Por estas causas se emplean métodos de concentración de heces por sedimentación, flotación o
bien una combinación de los dos.
MATERIALES
Tubo de ensayo
Resultado de imagen para tubo de ensayo
Almacenan temporalmente sustancias o muestras (sólidos o líquidos), especialmente para pruebas y ensayos cualitativos.
Portaobjetos
Resultado de imagen para portaobjetos
Lamina de vidrio rectangular de color transparente utilizada para almacenar muestras y objetos con el fin de observarlas bajo el microscopio.
Cubreobjetos
Resultado de imagen para portaobjetos
Lámina delgada de cristal de forma cuadrangular con la que se cubren las preparaciones o los cuerpos que se observan en un microscopio.
Gasa estéril
Resultado de imagen para gasa
Sirve como apoyo al embudo, para que los restos de muestra se filtren con la preparación a utilizar.
Mechero de Bunsen
Resultado de imagen para mechero de bunsen
Es usado para la esterilización de muestras o equipos de laboratorios

Palillo de madrea  
Resultado de imagen para palillo de madera
Con el se toman pequeñas partes de la muestra para realizar el frotis dentro del portaobjetos.
Gradilla
Resultado de imagen para gradilla
Utensilio utilizado para dar soporte a los tubos de ensayos o tubos de muestras.
Embudo y vaso de precipitado
Resultado de imagen para embudo
Resultado de imagen para vaso de precipitado
Un embudo es una pieza cónica de vidrio o plástico que se utiliza para el trasvasijado de productos químicos desde un recipiente a otro. También es utilizado para realizar filtraciones

Vaso de precipitado. 
Un vaso de precipitado es un recipiente cilíndrico de vidrio borosilicatado fino que se utiliza muy comúnmente en el laboratorio, sobre todo, para preparar o calentar sustancias, medir o traspasar líquidos. 
R E A C T I V O S
Solución salina
Resultado de imagen para solucion salina
La solución salina, conocida también como solución fisiológica es una composición liquida formada por agua y sal en la misma proporción en que se encuentran los fluidos de nuestro organismo.
Lugol
                          

                    
Es una solución de yodo metálico y yoduro de potasio que sirve para identificar polisacáridos. Cuando se agrega una sustancia que lleva almidón a una solución de yodo (Lugol), esta se tiñe de un color violeta intenso. Esto es debido a que los átomos de yodo se introducen en las espirales (amilosa), dándoles esa coloración.
Aceite de inmersión
                          

                       
 Resultado de imagen para aceite de inmersion
El aceite de inmersión es un líquido viscoso y transparente que tiene un alto índice refractivo. Por este motivo es muy utilizado en las observaciones microscópicas, ya que brinda la propiedad de concentrar la luz cuando esta pasa a través del objetivo de 100X del microscopio, aumentando su poder de resolución.
E Q U I P O
Microscopio
               Resultado de imagen para microscopio 
Un microscopio es un instrumento que nos permite observar entes demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. Por ejemplo, algunos microorganismos.


PROCEDIMIENTO
1.- Tomar muestra con el abatelenguas y colocarla en vaso precipitado.


2.- Agregar 10 ml de solución saturada de cloruro de sodio y formar suspensión.


3.- Filtrar con la ayuda de gasa.






4.- Colocar el líquido en tubos de ensayo llenando completamente, de ser necesario se agregará más solución.
                        

5.- Colocar un portaobjetos en la parte superior del tubo.
                                 

6.- Dejar reposar de 5 a 10 minutos, concluido el tiempo se toma el portaobjetos con el contenido y se agrega una gota de lugol. Para poder realizar la observación en el microscopio con seco débil y seco fuerte.


CONCLUSIÓN
El método de concentración por flotación de Willis es una nueva técnica que usamos en el laboratorio, un procedimiento que realizamos por primera vez y del cual, reconocemos su gran utilidad, resaltando su sencillez y eficacia.
Además, en esta técnica no requerimos de mucho tiempo, ni materiales, a través de un breve procedimiento es posible llegar a la obtención de resultados, haciendo una observación mediante el microscopio y de esta manera poder identificar protozoarios y huevos de helmintos en muestras de heces.
El apoyo de nuestro docente, fue de suma importancia para la interpretación de resultados, ya que, es posible que se llegue a confundir la morfología de un parásito con otros compuestos pertenecientes a la flora normal de nuestra muestra. De la misma forma que hacemos un reconocimiento en el ámbito pedagógico a nuestra profesora; todos los conocimientos teóricos que transmite en el contacto de profesor - alumno en la estancia en el aula, se convierten en herramientas de gran apoyo para lo mencionado anteriormente. 

RESULTADOS Y POSIBLE DX
No se reportó ningún microorganismo fuera de lo normal en nuestra muestra, únicamente visualizamos ciertos percances de la tinción, sin embargo, realizamos las investigaciones pertinentes para conocer los posibles parásitos a identificar.
Este método, resulta ser de gran utilidad para la identificación de algunos huevos como los de Dipylidium, Taenia solium y Trichinella spiralis. 


 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
Autor: Desconocida 
Fecha de Publicación: Desconocida
Título: Técnicas de diagnostico de parásitos antemorten
Fecha y hora de Consulta: 18 de octubre del 2019 a las 16:59 pm

Autor: Universidad Nacional del Rosario
Fecha de Publicación: Desconocida
Título: TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO
PARASITOLÓGICO
Fecha y hora de Consulta: 17 de octubre de 2019 a las 16:58 pm

Autor: Desconocido 
Fecha de Publicación:  13 de noviembre de 2015
Título: Métodos simples y prácticos de diagnóstico laboratorial de las principales parasitosis intestinales.
Fecha y hora de Consulta: 17 de octubre de 2019 a las 17:17 pm/

Autor: ELSEVIER
Fecha de Publicación: 2012
Título: Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica
Fecha y hora de Consulta: 11 de octubre de 2019 a las 20:00 pm
Dirección URL: https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-diagnostico-microbiologico-cryptosporidium-spp-giardia-S0213005X12001711 

Autor: Desconocido 
Fecha de Publicación: 29 de julio de 2017
TítuloTécnicas histológicas. Protocolos.
Fecha y hora de Consulta: 18 de octubre de 20l9 a las 18:09 pm

Dirección URL: https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/protocolos/s-colorante-fucsina-escarlata.php 


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