REPORTE DE PRÁCTICA "MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR SEDIMENTACIÓN RITCHIE"
SUBMÓDULO: IDENTIFICA TÉCNICAS PARASITOLÓGICAS
PRÁCTICA: MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR SEDIMENTACIÓN "RITCHIE"
PROFESORA: ING. IVONNE ÁVILA VALENCIAGRUPO: 3DM
ESPECIALIDAD: LABORATORIO CLÍNICO
FECHA: 22/11/19
INTEGRANTES DEL EQUIPO:
DANIELA CORNEJO BARRERA N.L. 16
ROSSYO PÉREZ MALDONADO N.L. 39
NOELIA SANTILLÁN VÍVEROS N.L. 47
JATZIRY SÁNCHEZ GÓMEZ N.L. 44
LUIS ANTONIO REYES VELEZ N.L. 41
JUAN LUIS HERNÁNDEZ VALDEZ N.L. 28
JULIAN SALINAS ZAYRA DE LA LUZ N.L. 29
CITLALLI RODRIGUEZ ESPINOZA N.L. 42
INTRODUCCIÓN:
El trabajo en el laboratorio
es uno de los aspectos clave en el proceso de enseñanza y aprendizaje de un
laboratorista clínico, tanto por el sustento a la parte teórica que se aporta a
los estudiantes, como el desarrollo de habilidades en la ejecución de las
actividades. La práctica que realizamos “Ritchie” fue de suma importancia para
convertirse en una base fundamental de nuestra carrera, específicamente en el
diagnóstico de helmintos. Es una técnica muy concreta, sin embargo, si no se
llevan adecuadamente los pasos durante el desarrollo, es posible que los
resultados sean erróneos. Se utiliza para diagnosticar helmintiasis y formas
quísticas, así como, para la evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.
Las parasitosis intestinales
causadas por geohelmintos son consideradas como un problema de salud pública
que afectan principalmente a países en vía de desarrollo y son proclives a
presentarse en población infantil
OBJETIVOS:
• Comprender y analizar el conjunto de
técnicas empleadas para llevar a cabo un conteo de huevos o quistes de formas
parasitarias.
• Identificar y diferenciar a los
microorganismos que se aíslen dentro de la muestra.
• Hacer uso de los conocimientos
adquiridos en el aula para el reconocimiento de las características de cada uno
de los microorganismos existentes en dicha muestra.
• Aprender sobre la marcha el proceso
para llevar a cabo de manera correcta la técnica “Ritchie”
• Conocer las propiedades que poseen
los compuestos químicos utilizados en la técnica de laboratorio para generar en
el tubo cónico una muestra que pasa por cuatro capas.
FUNDAMENTO:
Es una técnica de
sedimentación basada en la concentración de quistes y huevos mediante la centrifugación
de la muestra, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los
elementos parasitarios. El fundamento de esta técnica se basa en la fuerza centrífuga
para obligar a los parásitos a ir al fondo del tubo, el éter que elimina los
detritus orgánicos y el formol ayuda a mantener la integridad de las formas
parasitarias que se concentran.
Por lo que, con la ayuda de
formol y éter se separan y visualizan los elementos parasitarios.
Las ventajas de este método
son que reúne y no deforma las posibles formas parasitarias, permite
transportar y almacenar la materia fecal procesada antes de ser examinada, pues
los agentes químicos conservan a los parásitos que existan en la muestra y se
usa cuando necesitan una técnica para evaluación de tratamiento y determinación
de frecuencia.
MATERIALES:
Muestra de heces
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Vaso de
precipitado
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Abatelenguas
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Embudo
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Gasa
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Tubos
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Propipeta
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Pipeta
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Solución salina
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Portaobjetos
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Cubreobjetos
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Solución de
formaldehido al 10%
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Yodo lugol
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Pipeta Pasteur con bulbo
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Éter
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Centrifuga
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Microscopio
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PROCEDIMIENTO:
1. Con el aplicador
de madera se coloca aproximadamente 1 g. de materia fecal en el vaso de
precipitado, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.
2. Se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en
el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico
3. Se centrifuga la suspensión durante 2 min a 2000 rpm.
4. Se decanta el sobrenadante y se suspende el sedimento
con solución salina, centrifugando, decantando y resuspendiendo 2 veces más.
5. Al último sedimento se agregan 10 ml de solución
formaldehido al 10%, se mezcla y se deja reposar durante 10 min.
6. Se añaden después 5ml de éter, se tapan los tubos con
tapones de caucho, y se agitan energéticamente durante 30 segundos.
7. Se centrífuga durante 2 minutos a 2000 rpm
8. Después de centrifugar se observan 4 etapas:
●
Éter en la superficial
●
Un tapón de restos fecales
●
Formaldehído
●
Sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los
elementos parasitarios.
9. Se decanta el sobrenadante
10. Se introduce la pipeta Pasteur, hasta el sedimento, se
extrae con cuidado una gota del sedimento, y se coloca en un portaobjetos.
11. Se le añade una gota de Lugol, y con uno de los ángulos del cubreobjetos, se
homogeniza cubriéndolo con el mismo.
RESULTADO
Y POSIBLE DX:
Particularmente nosotros no
encontramos ningún microorganismo en nuestra muestra, sin embargo, realizamos
las investigaciones pertinentes para conocer los posibles a identificar. Se
encontraron fibras de tejido muscular semidigeridas, restos de comida y algunas
grasas.
Este método es empleado para
el diagnóstico de protozoarios, trematodos, cestodos, nematodos y
ocasionalmente, algunos artrópodos. Tales como formas morfológicas de Cryptosporidium, huevecillos de Tenias, etc.
Todos los anteriores comparten
una sintomatología similar:
- Dolor abdominal
- Diarreas frecuentes
- Fatiga
- Cefalea
CONCLUSIÓN:
Gracias a la práctica
realizada logramos obtener nuevos conocimientos y técnicas de trabajo, incluso
retomamos aprendizajes del módulo pasado “Auxilia en los procesos básicos de
laboratorio”, tales como el cuidado y manejo de los materiales y aparatos de un
laboratorio clínico, así como el tratamiento adecuado que se le debe dar a un
RPBI según sea su clasificación. Todos estos conocimientos los ejercimos en
esta práctica y de igual manera lo trabajaremos en las siguientes.
El apoyo de nuestro docente,
fue de suma importancia para la interpretación de resultados, ya que, es
posible que se llegue a confundir la morfología de un parásito con otros
compuestos pertenecientes a la flora normal de nuestra muestra.
En México, se ha empleado la
técnica de Ritchie como complemento del examen directo, pero no todos los
laboratorios la realizan, porque éter que se usa como reactivo se adquiere de
importación y no está al alcance de nuestras instituciones de salud. Por tal
motivo, algunos de los laboratorios de investigación están haciendo pruebas
experimentales que puedan sustituir al éter por la nafta, más barata y de
producción nacional.
Sería bueno que nosotros como
estudiantes también pudiéramos hacer la prueba con nafta para comprobar como
son los resultados en el diagnóstico de protozoos y poder comparar con el
método tradicional.
REFERENCIAS
BIBLIOGRÁFICAS:
Autor: Desconocido
Fecha de Publicación: 2008
Título: Manual de laboratorio
de parasitología
Fecha y hora de Consulta: 22
de Noviembre de 2019 las 17:00 pm
Autor: Desconocido
Fecha de Publicación:
Desconocida
Título: Materiales e
instrumentos de laboratorio
Fecha y hora de Consulta: 21 de
Noviembre de 2019 las 19:00 pm
Dirección URL: https://www.tplaboratorioquimico.com/
Brown, H. W. Parasitología
Clínica Edit. Interamericana. México, 1985. Pp. 337-338
Autor: Desconocido
Fecha de Publicación:
Desconocida
Título: Técnicas coproparasitoscópicas
Fecha y hora de Consulta: 21
de Noviembre de 2019 las 18:00 pm
Autor: Desconocido
Fecha de Publicación: Desconocida
Título: Atlas de parasitología
Fecha y hora de Consulta: 22 de
Noviembre de 2019 las 18:00 pm
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